CHO细胞储存培养基：优化细胞增殖和功能
CHO细胞储存培养基：优化细胞增殖和功能
1. 引言
Chinese hamster ovary (CHO) 细胞是生物制药行业中广泛使用的哺乳动物宿主细胞。它们以其高产蛋白表达和易于培养的特性而闻名。CHO 细胞的存活和增殖依赖于优化培养基的成分。本文将探讨 CHO 细胞储存培养基的关键组成部分及其对细胞性能的影响。
2. 营养成分
CHO 细胞储存培养基包含一系列营养成分，包括：
1. 氨基酸：必需和非必需氨基酸是细胞蛋白合成的基本组成部分。
2. 维生素：维生素在细胞代谢中发挥着至关重要的作用，确保细胞正常生长和分化。
3. 无机盐：无机盐提供细胞所需的电解质，维持渗透压平衡并激活酶。
4. 葡萄糖：葡萄糖是 CHO 细胞的主要能量来源。
3. 生长因子和激素
生长因子和激素是调节细胞增殖、分化和存活的重要信号分子。CHO 细胞储存培养基通常补充以下生长因子：
1. 胰岛素样生长因子 (IGF-1)：促进细胞增殖和存活。
2. 表皮生长因子 (EGF)：刺激细胞增殖和分化。
3. 转化生长因子-α (TGF-α)：促进细胞增殖和表型稳定。
4. 转化培养基
转化培养基用于从 CHO 母细胞选择和培养产生抗体的杂交瘤细胞。它含有：
1. 低丝氨酸：抑制杂交瘤细胞中丝氨酸依赖性脱氨酶 (SDAT) 的活性，从而导致仅存活无丝氨酸磷酸合成酶 (CPS) 活性的细胞。
2. 次黄嘌呤：抑制肌苷酸合成，从而选择 CPS 阳性细胞。
3. 细胞融合促进剂：PEG 或电融合，用于促进杂交瘤细胞的形成。
5. 抗生素和抗真菌剂
抗生素和抗真菌剂添加到 CHO 细胞储存培养基中以预防微生物污染。常用抗生素包括青霉素、链霉素和庆大霉素。抗真菌剂通常包括安福特利辛 B 和制霉菌素。
6. 血清和白蛋白
血清（通常是小牛血清）和白蛋白经常添加到 CHO 细胞储存培养基中，以提供细胞粘附因素、生长因子和保护性蛋白质。
7. pH 和渗透压
CHO 细胞储存培养基的 pH 和渗透压必须严格控制。通常的 pH 范围为 7.0-7.4，渗透压范围为 290-310 mOsm/kg。
8. CHO 细胞储存培养基的优化
CHO 细胞储存培养基的优化是获得高产和稳定的细胞培养至关重要的一步。优化过程包括：
1. 成分筛查：确定培养基中不同成分对细胞增殖、存活和蛋白质表达的影响。
2. 培养条件优化：探索温度、pH 值和搅拌速度等参数对细胞性能的影响。
3. 培养基长期稳定性：评估培养基在储存期间的稳定性，以确保一致的细胞性能。
9. 结论
CHO 细胞储存培养基是保持细胞增殖、存活和功能的关键因素。通过了解培养基的关键成分及其对细胞性能的影响，可以优化培养条件，进而提高生物制药的产量和质量。持续的研发对于进一步完善 CHO 细胞储存培养基的配方和优化细胞培养过程至关重要。
标签： 细胞储存介绍
相关文章
发表评论