干细胞鉴定方法(干细胞的鉴定方法)
求助鉴定细胞是干细胞还是癌细胞的方法
用流式检测一下细胞表面标志吧。网上的资料:
胚胎干细胞的标志物
Oct-4: Oct-4(也叫Oct-3或Oct3/4)属POU转录因子一员,最初鉴定为DNA结合蛋白,可通过顺式元件活化基因转录。它在全能胚胎干细胞(ES)和生殖细胞表达。该表达对于维持干细胞的自我更新和多能性是必要的。4 ES的分化导致Oct-4的下调。5 Oct-4不仅是细胞系多能分化的主要调节因子,而且也是首要的作为鉴定全能ES细胞的标志物。
SSEAs: SSEAs 最初是用来鉴定识别糖脂表位的三个单抗。SSEA-1表达在前移植期的鼠胚表面(如八细胞期)并且也发现存在于畸胎瘤干细胞表面,但不存在分化的衍生细胞中。输卵管上皮、子宫内膜、附睾, 成年鼠脑和肾小管区域也发现和SSEA-1抗体反应。SSEA-3和4在卵子发生时合成,在卵母细胞、受精卵和早期卵裂球细胞膜上存在。这些与糖链相关的分子的生物学功能被认为是调控发育期的细胞膜间的相互作用。未分化的灵长类ES细胞,人的EC和ES细胞表达SSEA-3和SSEA-4,但不表达SSEA-1。未分化的小鼠ES细胞表达SSEA-1,但不表达SSEA-3或SSEA-4.
造血干细胞的标志物
CD34(细胞表面的唾液粘蛋白):CD34自从被发现存在于少量人骨髓细胞以来就是兴趣的焦点。从骨髓和外周血来源的CD34阳性富集的细胞群体显出大部分的造血活性。CD34被认为是造血干细胞 (HSCs). 的标志物。CD34在原始细胞分化为成熟细胞后表达下降.这点也发现在克隆的祖细胞和一些细胞系的干细胞。尽管CD34功能未知,但现在认为它参与早期造血CD34是HSCs的标志物的理论近年受到挑战。Osawa等人首先证明小鼠HSCs可以是CD34阴性。并且,人的CD34阴性细胞也有低水平的嫁接和造血能力。移植研究表明胎绵羊CD34阴性细胞有重新繁殖的能力。并且也表明人和鼠的CD34阳性细胞可能来源于CD34阴性细胞。总的说来,这些报告提示,HSCs可能是CD34+或CD34-。只选择表达CD34的细胞可能导致将更原始的干细胞排除在外。然而几乎所有的临床和实验流程包括体外培养、基因疗法和HSC抑制,目前都设计成收集富含CD34+的细胞。
CD133: CD133, 是120kDa糖基化蛋白,包括5个跨膜结构域,最初是通过AC133单抗鉴定的,它能识别人HSCs的CD34+亚类29,30。一种CD133异构体AC133-2, 最近已经被克隆并鉴定为可被AC133抗体识别的原始表面抗原。CD133可以作为用CD34筛选HSC和体外扩增的补充。CD133+富集的亚类可以以同CD34+ 富集的亚类扩增的方式扩增,从而可保留多系增殖的能力。最近的研究为CD133的表达不限于原始血细胞提供了脸部太干怎么护理证据,同时也确定了非造血组织中一类独特的细胞群体。来源于外周血的CD133+ 可被体外诱导分化为内皮细胞。并且,can be induced to differentiate into endothelial cells in vitro.并且,人的神经干细胞用抗CD133抗体可被直接分离。
ABCG2: ABCG2 (ATP-binding cassette superfamily G member 2) 广泛存在于各种干细胞上,并决定了SP细胞的Hoechst 阴性染色表型。ABCG2是ABC转运体家族的成员,并首先定位在乳腺癌细胞系上。ABCG2在CD34阴性细胞上出现的几率最大,但细胞表达CD34后,ABCG2下调。ABCG2的下调也表现在很多造血祖细胞上。因此在原始HSC分离鉴定上,ABCG2比CD34更有希望。ABCG2特异性的表达决定了猴骨髓细胞、小鼠骨骼肌细胞和ES细胞中的Hoechst SP表型。对心肌和骨骼肌细胞可以从移植的骨髓来源的SP细胞再生证明了SP细胞的潜在可塑性. ABCG2在SP细胞上的专一表达提示ABCG2可能成为是成体多能干细胞阳性筛选的潜在标志物。ABCG2在干细胞发育生物学里也扮演着一定的功能上的角色。
Sca-1: Sca-1 (stem cell antigen 1, Ly-6A/E), 是18kDa磷脂酰肌醇锚定蛋白,属Ly-6抗原家族成员。43 Sca-1被广泛认为和Ly-6 半抗原一起,是小鼠HSC标志分子,它在多能HSCs上表达。一种抗Sca-1抗体经常和一些细胞表面标志分子表达的阴性选择一起用来鉴定和分离小鼠HSCs. Sca-1+ HSCs可在成年骨髓、胎儿肝脏、成年动物流动的外周血和脾脏中被找到。Sca-1在几种非造血组织中也被发现。43可用来富集HSCs之外的祖细胞。Sca-1 可能参与调节B细胞和T细胞活化。
间质干细胞的标志物
STRO-1: 用CD34阳性骨髓细胞进行免疫产生的小鼠IgM单抗STRO-1, 能识别一种人骨髓基质成分表达的表面抗原。在骨髓细胞中,STRO-1+/血型糖蛋白A-细胞群中的纤维母细胞集落形成细胞富集的频率约100倍于STRO-1+/Glycophorin A+群体。一种STRO-1+ 富集的骨髓细胞亚群有能力分化为各间质细胞系,包括带有血管平滑肌样表型的支持造血的基质细胞、脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞。STRO-1作为一种有价值的抗体,可用来鉴定、分离和功能检测人骨髓基质祖细胞,这些细胞和原始的HSCs有明显区别。
神经干细胞的标志物
Nestin: Nestin是VI型中间丝蛋白,尽管它主要表达在中枢神经系统的干细胞上,它几乎不在成熟中枢神经细胞上表达。Nestin在非神经元干细胞上也表达,例如胰岛祖细胞和造血前体细胞。
PSA-NCAM (Polysialic acid-neural cell adhesion molecule): 胚胎时期的NCAM和PSA-NCAM经常高唾液酸化,在神经元发育中起重要作用。PSA-NCAM可能和突触的重排和可塑性有关。在成年,PSA-NCAM的表达限制在保留可塑性的区域。神经元限制性的前体细胞可由高表达PSA-NCAM而鉴定,它们可经历自我更新和分化为多种表型的神经元。PSA-NCAM阳性的新生儿脑前体细胞将发育为胶质细胞,甲状腺素可调控它们变为少突细胞。多唾液酸的修饰可显著降低NCAM的黏附,从而PSA-NCAM被认为是纯粹的抗黏附分子,可以调节细胞的相互作用,促进脑的可塑性。更进一步的证据表明PSA-NCAM 可能和未知的信号分子反应,发挥诱导发育的角色。
p75 Neurotrophin R (NTR): p75 NTR,也称为低亲和神经生长因子受体,属1型跨膜TNF受体超家族。它可和NGF, BDNF, NT-3和 NT-4 结合 (低亲和力)。p75NTR, 在Trk存在时被活化, 提高对神经营养因子的反应性。TrkC受体和 p75 NTR 协同作用,参与神经系统发育。神经冠干细胞(NCSCs)根据它们表面表达p75NTR而已被分离。从外周神经组织新鲜分离的p75NTR+ NCSCs可体内和体外自我更新并产生神经元和神经胶质细胞。并且神经上皮来源的p75NTR+在培养中也有能力分化为神经元,平滑肌和雪旺细胞。最近,p75 NTR 已经被用来作为鉴定间质前体细胞和肝星形细胞的标志分子。
请教各位干细胞的体外鉴定标准是什么?标记物的意义
目的初步筛选出肝母细胞瘤(HB)中的肿瘤干细胞(NSC)相关表面标记组合,并了解NSC的分布。方法选择入住江西省儿童并接受的HB患儿,采用免疫组织化学染色的方法,观察干细胞相关标记物CD34、Thy-1、c-kit、CD56和干细胞生长因子(SCF),在HB组织及距肿瘤组织边缘3cm以外的正常肝脏组织的表达和分布。结果
Thy-1、c-kit散在分布于HB组织中,主要集中在汇管区,而正常肝脏组织中不表达;CD34及SCF在HB中的表达明显高于正常肝脏组织(P0.05),其中CD34主要在血管内皮系统中分布,SCF主要表达在汇管区;CD56表达于成簇的神经纤维组织中,在HB及正常肝脏组织中表达差异无统计学意义(P0.05)。结论不同干细胞相关表面标志物分布于HB组织中,并且集中表达在特定区域。表达Thy-1/c-kit阳性细胞可能对HB的发生起一定作用。
法妍丽苹果干细胞怎么辨别真假
只有一个方法,将干细胞注入生理盐水。
干细胞必须是活细胞,才有可能具备分化和修复能力,而这类细胞的保存方式十分极端,必须在零下190度以下彻底冷冻才能保持活性。干细胞作为活细胞,为防止干细胞结团,最好的接种方式是将干细胞注入生理盐水,再用滴注的方式进入人体内才可以存活并最好的发挥效用。干细胞作为活体细胞,存在一定的安全风险,必须有十分高标准的安全保障措施。
事实上,干细胞跟美容的确没什么直接联系。因为其作用主要是体内修复,随着血液走遍全身,遇见受损伤的器官组织,可以分化成器官需要的细胞,帮助器官恢复机能。其中自然也包括恢复皮肤的活力,使皮肤具备抗衰老的能力,因此可以减少因为衰老而产生的皮肤后遗症,比如皱纹,老年斑,暗疮等等。因为皮肤的改变是肉眼可见,因此干细胞会被美容行业蹭上热点。事实上,干细胞的功能远不止如此,由于它的分化和修复能力,可以治疗或缓和许多由于器官衰老导致的亚健康和慢性疾病,比如三高,更年期,习惯性流产,肝硬化,前列腺障碍以及子宫,卵巢的修复保护等等。所以,干细胞只是帮你干细胞美容行业排行榜修复整体机能时,顺带为你放疗后皮肤如何护理做了个美容而已。
肿瘤干细胞分离鉴定的常用方法有哪些
现在认为已鉴定出的肿瘤干细胞的肿瘤有:AML、乳腺癌和脑肿瘤。05年已经又鉴定出了肺癌,前列腺癌,好像黑色素瘤的也出来了培养肿瘤干细胞基本都用无血清的培养基,加上一些生长因子,悬浮培养肿瘤干细胞。不同的肿瘤干细胞,所加的生长因子不同。不知你要培养什么肿瘤干细胞,建议你查一些相关的文献。
(仅供参考)
怎么鉴定一个细胞是干细胞?
干细胞在形态上具有共性,通常呈圆形或椭圆形,细胞体积小,核相对较大,细胞核多为常染色质,并具有较高的端粒酶活性。干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞。
干细胞具有自我更新复制的能力(Self-renewing),能够产生高度分化的功能细胞。
用什么样的实验手段鉴别造血干细胞?
造血干细胞具有自我更新和能够多向分化两大特性。所谓自我更新,是指造血干细胞经过无数次有丝分裂后,仍然保持亲代细胞原有的特性;多向分化是指它能产生所有种类的血细胞,如红细胞、粒细胞、无粒细胞和血小板等。处于自我更新与已经分化了的造血干细胞数目各占一半,即半数细胞保存于造血干细胞池内,另半数进行分化而离开造血干细胞池。自我更新不是无限的,一个造血干细胞经约100~500次的增殖分裂后,自我更新能力就明显减弱。由于在正常情况下极少部分造血干细胞进行有丝分裂便可维持正常造血,而绝大多数处于静息状态,所以造血干细胞的这种自我更新能力不会衰竭,可以维持在正常机体的全部生命时间。
血细胞生成后,通过骨髓造血组织与血管之间的一道屏障进入血循环,成年男性每天大约有2000亿个红细胞、100亿个粒细胞和4000亿个血小板通过这一屏障进入血循环。衰老伤亡的血细胞则被脾脏、肝脏及骨髓等处的巨噬细胞吞噬,部分白细胞从消道、呼吸道的粘膜排出体外。
通过干细胞的行为方式和其表面上的化学物质来认识干细胞
造血干细胞有两个重要特征:其一,高度的自我更新或自我复制能力;其二,可分化成所有类型的血细胞。造血干细胞采用不对称的分裂方式:由一个细胞分裂为两个细胞。其中一个细胞仍然保持干细胞的一切生物特性,从而保持身体内干细胞数量相对稳定,这就是干细胞自我更新。而另一个则进一步增殖分化为各类血细胞、前体细胞和成熟血细胞,释放到外周血中,执行各自任务,直至衰老死亡,这一过程是不停地进行着的。
相关文章
发表评论
评论列表
- 这篇文章还没有收到评论,赶紧来抢沙发吧~