抑制干细胞分化的方法（干细胞的去分化现象）

请问诱导干细胞的财税图标分化的方法有哪些啊？

自1981年英国的Evans等从小鼠囊胚的内细胞团（Inner

cell

mass，ICM）分离建立胚胎干细胞（Embryonic

stem

cells，ES细胞）以来，ES细胞的研究就一直是各国研究的热点。近两年，ES细胞分化诱导以及调控方面的研究取得了细胞冻存盒使用前要恢复常温吗很多重要的进展，已从ES细胞诱导出神经细胞、心肌细胞、血管和内皮细胞等。利用ES细胞的定向分化可望在基因研究、细胞治疗和组织器官替代治疗等的研究中发挥重要作用。

1.常用的体外诱导方法是在体外培养的成体干细胞中加人入诱导因子。诱导因子包括各种能影响细胞分化的物质，如血清、糖分、维生素、以及各种蛋白因子等。

2.日本学者Oh等首先报道，高浓度肝细胞生长因子(HGF)体外诱导大鼠骨髓细胞分化为肝细胞，并表达CK8,

CK18,

ALB等。

3.2002年，Schwartz等将大鼠、小鼠和人的多能成体前体细胞(MAPC)接种到铺有基质明胶或纤维连结素的培养瓶中，用60％DMEM(低糖型)+

2%

FCS培养体系培养，并加入HGF和/或成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)，在培养的第7天，MAPC分化为表达肝细胞核因子-3BETA,GATA-4

,CK-19和AFP的上皮样细胞，在第14-28天，这些上皮样细胞表达CK-18,

HNF-4和HNF-1

alfa。大约在第21天，CK-18和ALB染色阳性。这些上皮样细胞也具有肝细胞功能特征:分泌尿素和白蛋白，能摄取低密度脂蛋白并贮存糖原。

4.结果表明，用HGF和FGF-4在体外能将MAPC诱导分化成具有形态、表型和功能特征的肝细胞。实验表明，FGF-4单用可诱导肝细胞分化，用HGF处理的细胞分化程度更高。

层细胞为什么抑制分化为什么抑制胚胎干细胞分化要

胚胎干细胞在体外能够分化,并且不需要特殊试剂诱导,这种是自然分化.一楼所说的诱导分化是定向分化,即是说令胚胎干细胞向某种细胞分化.

如果说让胚胎干细胞只增殖不分化,需要控制培养条件和添加抑制分化的因子.这样的做法非常常见,因为只增殖不分化,才有可能得到大量的胚胎干细胞,如果让它分化了就不再是胚胎干细胞了.胚胎干细胞在体外能够分化,并且不需要特殊试剂诱导,这种是自然分化.一楼所说的诱导分化是定向分化,即是说令胚胎干细胞向某种细胞分化.

如果说让胚胎干细胞只增殖不分化,需要控制培养条件和添加抑制分化的因子.这样的做法非常常见,因为只增殖不分化,才有可能得到大量的胚胎干细胞,如果让它分化了就不再是胚胎干细胞了.

饲养层细胞为什么抑制分化

饲养层细胞实际上上皮细胞或成纤维细胞，这类细胞表面具有的信号蛋白可以刺激附着其上的其他免疫细胞的拆迁队细胞，尤其是干细胞维持幼稚状态而不分化。

胚胎干细胞培养需要先制备滋养层细胞来抑制其分化，对不对

es细胞培养时加饲养层不会促进细胞分化，通常使用的饲养层细胞为成纤维细胞，能够分泌一些促进干细胞维持的因子。

传代培养是指将培养皿中生长的细胞用酶消化后，重新吹开后接种至新的培养皿中培养。

表皮干细胞的分化的调控

干细胞的分化行为是被预先程序化还是受周围环境的调控一直是一个有争论的话题，但干细胞所处的微环境[又称为干细胞壁龛（niche）]对干细胞分化调控的影响是存在的[8]。干细胞的分化受细胞与细胞（包括间质细胞如成纤维细胞、肥大细胞等）、细胞与细胞外基质间相互作用的影响。细胞因子在传递细胞与胞外基质之间、细胞与细胞之间的信息中起重要作用，这些细胞因子包括白细胞介素（Ils）、干细胞生长因子（CSF）、表皮细胞生长因子（EGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、肝细胞生长因子（HGF）等。细胞与细胞间相互调控信息还可通过细胞间黏着连接的β连环蛋白（β-catenin）来传递。此外，细胞外基质成分的改变也影响干细胞的分化，整合素在其中起重要作用。当干细胞微环境发生改变如损伤时，胞外某些信息可通过整合素α5β1、αvβ5及αvβ6传递给干细胞，以触发跨膜信号转导，调控细胞的基因表达。这一过程不仅可以改变干细胞的分裂方式，而且也激活干细胞的多潜能性，使干细胞产生一种或多种定向祖细胞，以适应组织修复的需要。因此，整合素α5β1、αvβ5及αvβ6也被称为创伤愈合过程中的应急受体（emergency receptor）[4，8]。此外，表皮细胞在生长环境发生改变时可能会发生反分化。实验发现，将在体已不表达整合素而表达角蛋白K10的有丝分裂后细胞分离进行体外培养，这类细胞又可表现出显著的增殖能力，这与在创伤修复过程中已分化的基底层上部的表皮细胞可重新获得增殖能力相似[5]。

表皮干细胞脱离干细胞群落进入分化阶段的一个重要表现是通过c-myc诱导并伴随表面整合素水平的下降，细胞对基底膜脱黏附，因而整合素水平的表达及干细胞的黏附特性可能是维持干细胞群落所必需的条件。整合素调控多种细胞的分化，其中表皮细胞与胞外基质黏附能力的缺失是终止干细胞进行自我更新而进行终末分化的强刺激因素。将β1整合素缺失的小鼠胚胎干细胞与表达野生型β1整合素的细胞相比，发现野生型干细胞能分化出完整的表皮细胞谱系，而β1整合素缺失的干细胞则不能产生分化的细胞。同样，当细胞外基质不存在时也诱导干细胞及短暂扩充细胞的分化，使表皮干细胞退出干细胞群落。此外还有实验发现细胞外基质具有修饰β1整合素表达与激活的作用。因而各种损伤因素引起的细胞外基质变化都可对干细胞的生物学行为产生作用。丝裂原激活蛋白酶(MAPK)在β1整合素调控表皮干细胞增殖分化的信号转导通路中起重要作用。将结构域阴性的β1整合素的突变体转染到培养的人表皮形成细胞，以干扰其β1整合素的功能，降低β1整合素的黏附性，结果发现转染成功的表皮干细胞表面β1整合素水平及细胞与IV型胶原的黏附性明显降低，MAPK活性减弱，细胞的克隆形成能力下降，增殖潜能丧失，表现出短暂扩充细胞的特征。但通过超表达野生型β1整合素或激活MAPK则可上调整合素的表达，恢复其黏附性及增殖潜能[9]。