细胞储存的常用温度（细胞储存条件）

本文目录一览：

• 1、为什么动物细胞培养过程中，通常在冷冻的条件下保存细胞？
• 2、红细胞保存温度
• 3、细胞冻存时的温度梯度有多重要（细胞冻存，温度
• 4、细胞的长期保存,一般采用
• 5、样本长期保存时需要温度
• 6、细胞壁多少温度融化

为什么动物细胞培养过程中，通常在冷冻的条件下保存细胞？

这个与细胞的生长代谢有关，在低温下，细胞内的各种酶的活性降低，细胞代谢减慢，延缓了护理面部套装细胞衰老凋亡的速度，而且酶蛋白的结构不被破坏，当温度回升时，酶的活性又重新恢复，细胞机能又重新或得。所以，要在低温下保存细胞。

红细胞保存温度

红细胞保存的温度是多2-6度。

红细胞的最佳保存环境是除去血浆、白细胞和血小板,得到浓缩红细胞,然|后再加人含有冷冻保护剂的营养液。1963年,Hoggins提出了采用葡萄糖凝聚法,并与专用装置相结合,使红细胞的分离和冷冻保存取得了实质性的进展。其后又有人提出了连续离心法,该法被美国红十字会血液中心采纳,从而在全世界迅速普及。

细胞冻存时的温度梯度有多重要（细胞冻存，温度

细胞冻存一般逐级降低温度，4度30min-1h，不要超过一个小时；－20度30min，不要超过30min，或者可以不需要，直接放到－70到－80度的冰箱，过夜，这一步是必须的，如果像你干细胞美容项目推广那样，估计细胞活力已经降低很多。不过还要看细胞类型，癌细胞应该还好一些，我干细胞美容注射价格表.百龄在那里的人表皮角质化细胞在－20度放了超过一个小时，过几天我特意拿出来检测，细胞又一半多已经失去活力了。

细胞的长期保存,一般采用

正确答案:C

解析：细胞低温冷冻保存是常用的细胞保存方法，细胞加入冻存液二甲基亚砜（DM-SO)，保存在液氮中，温度达-196℃，可长期保存

。

样本长期保存时需要温度

常见样本储存温度的选择

选择储存温度应考虑样本的类型、预期储存的时间、样本中生物分子的特性、不同细胞的特

性。

细菌和细胞的活性临界温度通常认为是-140°C，在这个温度下，所有的代谢活动都停止，对

于能承受在此温度下保存的样本，建议选择低于这个温度进行储存，利于长期稳定的储存。

一些样本不能承受这么低的温度，它们的储存温度一般选择-80°C，在此温度下，代谢活动

并没有完全停止。另外，一些经过特殊处理的样本，则可在低温和室温条件下储存。

1）固体组织样本的储存温度：

长期储存的新鲜冰冻组织和 OCT包埋冰冻组织应储存于液氮中，冰冻组织切片或者用于

DNA 和 RNA 提取的冰冻组织应储存在-80°C。经过福尔马林固定的石蜡包埋组织及组织切

片应储存在室温，在低于 27°C的环境下，并控制虫患和湿度。

2）液体样本的储存温度：

对于液体样本，包括血液和尿液，样本里的各种成分应在储存前分离，使得每一种成分能够

在最佳条件下储存。全血、血清、血凝块、非淋巴细胞和血浆样本应储存在-80°C。血沉棕

黄层和白细胞应储存在液氮中。尿液应储存在-80°C或者液氮中。

3）细胞的储存温度：

长期保存的细胞系应储存在液氮中。气相液氮比液相液氮储存样本更好。虽然液相液氮的温

度更低一些（-196°C），但气相液氮的温度（-150°C）仍在临界温度之下。对于需要但没有

条件使用液氮保存的细胞样本，应至少储存-80°C环境中。

细胞壁多少温度融化

细胞一般储存在液氮中，温度达-196℃，理论上储存时间是无限的。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融，实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。

细胞复苏就是要把原本冷冻保存(冻存)着的细胞恢复到一般的生长状态，今天我们来看看原代细胞的复苏步骤。

一、检查

收到细胞株包裹时，请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形，若有请立即处理告诉寄方。细胞株请尽速开始培养，或立即冷冻保存(置于–70 °C，隔夜后，移到液氮罐保存)。

二、冷冻细胞解冻

方法一：

1、准备好37度水浴锅，预热至37度；

2、准备好T25培养瓶，加入10ml完全培养基（培养基量必须大于冻存液10倍体积）；

3、取出冻存细胞管，用一次性PE手套包裹冻存管（防止管内进水导致污染），迅速放于水浴锅内，于1min内融化完全；

4、取出冻存管，酒精喷洒消毒后擦干，置于超净台内；

5、吸取冻存管内细胞悬液，加入步骤2中准备好的T25培养瓶内，8字缓慢摇匀；

6、培养瓶放于37度CO2恒温培养箱内，静置培养24h，更换新鲜换培养基（注意贴壁细胞、悬浮细胞不同操作方法）。

方法二：

1、准备好37度水浴锅，预热至37度；

2、准备好15ml无菌离心管，加入10ml完全培养基（培养基量必须大于冻存液10倍体积）；

3、准备好实验用培养板或培养器皿；

4、取出冻存细胞管，用PE手套包裹冻存管（防止管内进水导致污染），迅速放于水浴锅内，于1min内融化完全；

5、取出冻存管，酒精喷洒消毒后擦干，置于超净台内；

6、吸取冻存管内细胞悬液，加入步骤2中准备好的15ml无菌离心管，轻轻吹打混匀；

7、将离心管内细胞悬液，按实验需求接种于实验器皿内（注意接种密度不低于2×104/cm2），放于37度CO2恒温培养箱内，静置培养24h，更换新鲜换培养基（注意贴壁细胞、悬浮细胞不同操作方法）。