干细胞无血清培养基成分(无血清培养细胞还会生长吗)
本文目录一览:
- 1、诱导干细胞分化为脂肪细胞所用的三氧免疫血液回输疗法培养基中有血清吗
- 2、动物干细胞培养基的成分
- 3、培养全能干细胞的培养基是三生诀兑换码什么,为什么
- 4、干细胞培养基和普通细胞培养基有什么不同?
- 5、求助,有人用无血清培养基养细胞吗
- 6、动物细胞培养的常用培养基类型有哪些?各有何特点和用途
诱导干细胞分化为脂肪细胞所用的培养基中有血清吗
诱导干细胞分化为脂肪细胞所用的培养基中有血清
培养基的选择:
细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了,但却不是最简单的。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好,转染、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,让我们先从培养基和血清说起。
◆ MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度。
◆ 改良的BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了。
◆ aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞。
◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。
◆ RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
准备几种培养基,然后花大约两周的时间做一个简单的细胞生长实验,来选择其中最适合的。
以前大部分实验室都是用干粉培养基,但配制过程就较为繁琐,要溶解、调pH值,过滤,过程中可能会产生一些浓度误差,而且有些实验室的水质并不理想,所以培养的效果会有差异。
血清的选择:
血清含有生长因子可促进细胞的繁殖,含有附着因子可促进细胞的贴壁,同时还具有抗胰酶活性。血清同时也是矿物质、脂类及激素的来源。最常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和马血清等。牛血清是按照采血时间的早晚来分类的。采血时间越早,营养物质越丰富,所含抗体也越少,因而胎牛血清适合要求高的细胞系和克隆化培养。
而血清批次间的差别就是不可避免的,这种差异来源于不同的制备方法和除菌方法、动物的年龄差别及血清的储存条件等,而且与取血动物的来源关系密切。不同的牧场、不同的气候天气及其他肿瘤来源外泌体靶向递送环境因素都可能影响血清的质量。因此选好了一种血清就要尽可能长期使用它。在需要更换时,也要尽量保持与原有的一批血清相似。现在很多公司都提供血清预留,你一旦选定了某个批次的血清,最好备足一年的量,这样可以避免很多麻烦。
血清固然是细胞培养中不可或缺的成分,但血清的批间差异大,更换血清时需要做大量的测试以取保替换的血清与原来的相似。而血清的供应也是必须要考虑的因素。
无血清培养基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顾名思义,就是在细胞培养中不需要添加血清,但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,能减少上述血清带来的不利因素,使细胞培养的条件更稳定。但它也不是完美的,从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外,它的价格也比普通的培养基贵很多。
这么多种,要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的,如用于培养内皮细胞的MCDB 131(Sigma),大部分液体培养基都是专利配方的,也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐,然后用自己的细胞做几次传代培养来选出最合适的培养基。毕竟实践出真知嘛。
动物干细胞培养基的成分
MS培养基。
其组成是在配制1升(1000毫升)培养基时,加硝酸铵1.65克、硝酸钾1.9克、氯化钙0.44克、硫酸镁0.37克、磷酸二氢钾0.17克、碘化钾0.83毫克、硼酸5.2毫克、硫酸镁22.3毫克、硫酸锌3.6毫克、钼酸钠0.25毫克、硫酸铜0.025毫克、氯化钴0.025毫克、硫酸铁27.8毫克、蔗糖30克和琼脂7克。其他生长调节物质要根据花卉的种类和培养目的而确定。MS培养基中大量元素浓度过高,为此常采用1/2、?大量元素浓度作培养用,这样生长效果列好。
配制培养基前要准备好三角瓶、试管、烧杯、量筒、吸和等玻璃器皿,预先称好药品。配制时先将琼脂溶化,再加入在水中深解的各种营养元素和蔗糖,然后用氢氧化钠或盐酸调整培养基的pH,一般掌握在5.7左右。以后可分注到养瓶中,盖好瓶盖。培养基配好要经高压灭菌。冷却后放到培养室预培养3天,如没有杂菌污染,才可进行花卉材料的接种。
培养全能干细胞的培养基是什么,为什么
培养全能干细胞的培养基是什么
动物细胞培养液:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清或血浆.
植物组织培养液的成分:水、无机盐、蔗糖、植物激素(生长素,细胞分裂素)等.
干细胞对培养条件要求较高,常用的胚胎肝细胞培养基有mTeSR 1培养基,主要成分有:DMEM、bFGF,EGF、血清、双抗、LIF、谷氨酰胺、二巯基乙醇、非必需氨基酸等。
干细胞相关的培养液都必须在5%CO2的气体环境中培养使用。否则会对细胞产生影响。气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一,所需气体主要有氧气和二氧化碳。氧气参与三羧酸循环,产生供给细胞生长增殖的能量和合成细胞生长所需用的各种成分。开放培养时一般把细胞置于95%空气加5%二氧化碳混合气体环境中。二氧化碳既是细胞代谢产物也是细胞生长繁殖所需成分,它在细胞培养中的主要作用在于维持培养基的pH值。大多数细胞的适宜pH为7.2-7.4,偏离这一范围对细胞培养将产生有害的影响。一般情况下,细胞耐酸性比耐碱性大一些,在偏酸环境中更利于细胞生长。
干细胞培养基和普通细胞培养基有什么不同?
干细胞无血清培养的特点是无血清、不含异源动物成分;所有成分都是明确的,且同种来源(人),包括蛋白质;不含抗生素;
普通细胞培养基是包含平衡盐水、细胞消化液、抗生素溶液、动物血清、氨基酸、激素、水解乳蛋白、胶原等成分。
求助,有人用无血清培养基养细胞吗
无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。无血清培养基的基本配方为基础培养基及添加组分两大部分。 无血清培养基可避免血清批次间的差异影响,提高细胞培养和实验结果的重复性,减少血清对细胞的毒性作用和血清源性污染,减少了血清中蛋白对某些生物测定的干扰,便于对实验结果的分析。基于无血清培养基以上的优势,ScienCell实验室根据不同细胞的生长特性研发了不同种类的无血清培养基。ScienCell无血清培养基列表如下:
1111 SMCM-sf 平滑肌细胞培养基
1511 NPrCM 神经前体细胞培养基
1521 NM 神经细胞培养基
1601 OPCM 少突胶质前体细胞培养基
1611 OsM 球状少突细胞培养基
2101 KM 角质细胞培养基
2111 KM-d 角质细胞培养基(确定)
2311 FM-sf 成纤维细胞培养基
2561 TEpiCM 扁桃体上皮细胞培养基
2611 OKM 口腔角质细胞培养基
2951 CoEpiCM 结肠上皮细胞培养基
3211 BEpiCM 支气管上皮细胞培养基
3231 SAEpiCM 小气管上皮细胞培养基
4121 EpiCM-2 上皮细胞培养基-2
4321 UCM 尿道上皮细胞培养基
4411 PEpiCM 前列腺上皮细胞培养基
5501 HemGM 造血细胞培养基
5801 STEMium 人胚胎干细胞无血清培养基
5811 STEMium-XF 无异种人胚胎干细胞生长培养基
5881 MEF-cm 小鼠胚胎成纤维细胞培养基
5891 bFGF-std MEF-cm 碱性成纤维细胞生长因子刺激的小鼠胚胎成纤维细胞条件培养基
5911 CSM 心肌细胞选择性培养基
5931 PSCNIM 多功能干细胞神经诱导培养基
6511 CEpiCM 角膜上皮细胞培养基
7311 OEpiCM 卵巢上皮细胞培养基
7511 MSCM-sf 间充质干细胞培养基
7611 MEpiCM 乳腺上皮细胞培养基
细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程,一般要逐步降低血清浓度,直至无血清培养。在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化,是否有部分细胞死亡,存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等。
ScienCell无血清培养基,是经灭菌的液体培养基,包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质。每套包含500毫升基础液,5毫升细胞生长添加物,5毫升双抗,混匀后即为完全培养基。每一款专用培养基均搭配特定类型的细胞生长添加物成分,为细胞的传代和生长提供最佳环境。
动物细胞培养的常用培养基类型有哪些?各有何特点和用途
动物细胞的培养基的种类和组成 分3类: ⒈天然培养基 ⒉合成培养基 ⒊无血清培养基
天然培养基:
天然培养基主要取自动物体液或从动物组织分离提取。其优点是营养成分丰富,培养效果良好,缺点是成分复杂,来源受限。天然培养基/液的种类很多,包括生物性液体(如血清);组织浸液(如胚胎浸液);凝固剂(如血浆)等。如:胎牛血清
合成培养基:
合成培养基(synthetic medium),又称为组合培养基,是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的,其所含的成分(包括微量元素在内)以及他们的量都是确切可知的。合成培养基一般用于实验室中进行的营养、代谢、遗传、鉴定和生物测定等定量要求较高的研究。比如:1640、DMEM
无血清培养基:
无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊椎动物细胞以制备单克隆抗体,病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清培养基含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素,以及一些蛋白质和清蛋白,纤维蛋白,胎球蛋白等,这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同的功能,如提供细胞贴壁所需的基质,抗生物反应器剪切力,作为脂质和其他生长分化因子的载体等。比如:间充质干细胞无血清培养基
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