大鼠神经干细胞分离(大鼠神经干细胞提取)
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传代是什么意思
传代是什么意思包括:1、子孙一代接一代地延续。2、把物品、技艺等一代一代地传下去。
详细释义:亦作“传袋”。旧时婚俗,新妇进入大门的仪式。新妇舆轿临门,男家以袋铺地,新妇踏在上面进门,取传宗接代的吉兆。亦有用褥或席铺地的,故又称“传席”、“转席”。
唐白居易《和春深》诗:“何处春深好?春深嫁女家……青衣传毡褥,锦绣一条斜。”所言即指此。《再生缘》第二四回:“传袋传袋,子孙万代。”代代相传。洪深《走私》:“乾隆窑青化磁。李家传代的,已经传了四代了。”
传代又称传袋,汉族婚俗之一。迎娶至男家,新娘下轿后直至进入洞房,双足不能履地,有人为之递传麻(布)袋铺于地,使之踏袋而行。俗谓新娘双脚不沾地纳吉。
传代例句:
1、在美国,那里是少的,但康普茶粉丝团在逐步增加,特别是在家酿造自已传代,一旦拥有就能接受。
2、方法从胚胎大鼠的大脑皮质、海马、纹状体等组织分离神经干细胞,用无血清培养技术在体外进行培养、扩增、传代和诱导分化。
3、目的:研究人毛乳头细胞条件培养基对高传代人毛乳头细胞的生物作用。
4、高传代人毛乳头细胞与低传代人毛乳头细胞共培养后出现凝集性生长趋势。
5、大鼠肝卵圆细胞能在体外传代培养,在一定条件刺激下可诱导分化为肝细胞。
中药是什么原理来治疗运动神经元的?
通过以兴奋性神经毒性损伤模型为观察对象,研究者发现,肌萎灵可促进兴奋性神经毒性损伤运动神经元细胞活力,减少细胞外乳酸脱氢酶的漏出,并能减少细胞调亡。说明肌萎灵通过多种途径对兴奋性神经毒性损伤运动神经元具有神经保护作用。通过应用激光共聚焦显微镜进一步观察神经元内钙离子浓度的变化发现,肌萎灵可抑制谷氨酸损伤后细胞内钙离子浓度的升高,说明肌萎灵保护损伤的运动神经元的作用机制可能与其抑制细胞内钙超载有关。
通过以应用体外细胞培养技术成功分离培养的大鼠胎脑神经干细胞为观察对象,应用液体闪烁计数法检测神经干细胞的增殖,应用免疫组化方法和流式细胞术检测神经干细胞分化状况,研究者认为,肌萎灵不但可促进神经干细胞增殖,而且可促进神经干细胞分化,尤其是向神经元方向分化,从而为肌萎灵治疗运动神经元病等神经系统疾病提供了科学依据。同时,研究者也提示,肌萎灵促进神经干细胞增殖和向神经元方向分化的作用,可能是其能扶元起痿、荣养生肌的作用机制之一。
以成功分离培养人骨髓基质细胞和人胚胎神经干细胞为模型,进行肌萎灵的实验研究,研究者发现,该药物在体外可促进人骨髓基质细胞增殖,并激发其向神经细胞分化的潜能,提高分化成神经元和星型胶质细胞的比例,并与剂量呈一定的关系。同时,肌萎灵还可提高骨髓基质细胞条件培养液作用下神经干细胞向神经元方向分化的比例。这一研究结果也为中药联合骨髓基质细胞、神经干细胞移植治疗运动神经元病等神经系统疾病提供了实验依据
神经干细胞移植的移植途径
依据神经干细胞能够向病变神经系统部位趋行、聚集的生物学特性,目前动物实验及临床应用中所使用的干细胞移植途径主要包括局部注射移植、经脑脊液注射移植、经血液循环注射移植。下面就各种移植途径的应用方法和主要特点概述如下。 1、立体定向脑内注射移植是目前动物实验和临床研究采用最多的干细胞移植方法。该技术是应用CT/MRI扫描定位后,图像象输入计算机,利用计算机规划移植靶点、手术路径,局部麻醉后,颅骨钻孔,插入探针,微量泵泵入神经干细胞。立体定向脑内注射移植手术具有定位准确,操作时间短,手术创伤小,患者在局麻下可承受该手术,利于术者检查患者配合情况,及时观察治疗反应的优点。该方法适合于病灶比较局限的疾病如脑出血后遗症、脑外伤后遗症、局灶性脑梗塞等,也适合具有集中神经功能核团支配的神经功能退行性疾病如帕金森症、阿尔茨海默病等。该方法是可以把干细胞全部集中到病灶及其周边发挥治疗作用,神经功能改善迅速、直接。但缺点是将神经干细胞直接注射于脑损伤区,脑内神经干细胞移植的成功率较低,这是因为脑损伤部位是一处不良的局部微环境区域,植入的神经干细胞有可能被激活的小胶质细胞和巨噬细胞所清除。经脑内移植尚有容积占位效应,致使神经干细胞移植量有限,这也是导致移植成功率降低的因素之一。此外,经脑内移植还可导致局部神经干细胞移过度聚集,不利于神经干细胞移的分化。头部穿刺手术,虽然创伤较小,但仍存在穿刺出血的风险,许多患者不愿意接受。
2、脊髓局部注射移植是目前治疗脊髓损伤的动物实验和临床研究最多采用的干细胞移植方法。该技术主要是在脊髓损伤的节段进行手术,依次切开皮肤、肌肉、韧带,咬除受伤节段的部分椎板,剪开硬脊膜然后在受伤脊髓节段上下两端注射干细胞。该方法的优点是移植的细胞分布在损伤脊髓两端发挥作用,同时手术可以起到减压的作用,促进部分脊髓功能的恢复。但缺点是创伤大,存在出血的风险,此外手术本身对脊髓是一次新的损伤有可能加重神经功能的缺失。 1、腰椎穿刺蛛网膜下腔注射移植
该方法是目前另一种较多采用的移植方法。该方法是利用腰椎穿刺技术,于腰椎3-5椎间隙,置入穿刺针达到蛛网膜下腔,注入神经干细胞。其优点是移植的细胞可以顺着脑脊液的循环途径流遍整个大脑和脊髓,可在宿主蛛网膜下腔中保持贴附、增殖和分化的能力,无论哪里有病灶,细胞都可以到达,适合于病变较为广泛的神经功能疾病的治疗,例如脑炎后遗症、脑发育不良、多发性脑梗塞等疾病。且该方法创伤很小,每次操作只需要十多分钟,病人始终处于清醒状态。该方法的缺点是移植的干细胞被分散到整个大脑和脊髓,干细胞迁移、趋行到什么部位难以控制,治疗效果没有定向脑内注射明确,同时干细胞需要顺着脑脊液循环至大脑,路径较长,且需通过脑脊液-脑屏障,细胞损失较多。此外干细胞直接进入脑脊液中,为环境完全不同于体外培养的环境,干细胞存活的数量仍存在疑问。
2、脑室穿刺注射移植
有部分动物实验和临床研究采取脑室穿刺注射移植的方法。该方法是给予患者侧脑室穿刺后,经穿刺针注射神经干细胞。动物实验研究证明通过脑脊液途径移植神经的干细胞可以特异性的迁移至脑损伤区域,对临床神经干细胞移植治疗方案的确定具有积极的意义。该方法的优点是脑室穿刺时干细胞可以直接到达脑室系统,循环至整个神经系统,移植点位于高位,路径较短,干细胞损失较少。植入细胞可远离损伤环境,同时避免损伤区的不良微环境影响移植细胞的成活,从而提高植入细胞的存活率,避免经脑内移植时的容积占位效应,增加植入细胞的数量,脑室内环境也为植入的NSCs提供了良好的迁移发育和定向分化的场所,有利于脑室植入细胞在内源性NSCs的迁移途径引导下,广泛快速地到达脑内损伤区。但此方法缺点在于,因为要经过脑脊液循环到达病灶区,需要移植的细胞数量要增加,此外脑室穿刺创伤较腰椎穿刺大,有穿刺出血的风险。脑室穿刺细胞移植与腰椎穿刺细胞移植的治疗原理和效果应该是基本相同,如果此移植途径可行,在临床上可以直接通过腰椎穿刺蛛网膜下腔注射进行细胞移植。
3、枕大池穿刺移植
该方法是动物实验中较多采用的移植方法,主要是从后枕部穿刺到枕大池注入干细胞。优点基本与其他细胞培养一般用什么细胞利用脑脊液途径移植的方法相同,动物实验中主要考虑腰椎穿刺和脑室穿刺的难度较大,该方法操作较为简单。但该方法不适合于临床应用也没有临床报道,主要因为后枕部穿刺的手术风险过大,可能造成脑干的损伤,危及生命。 1、静脉内注射移植:
静脉内注射移植的方法目前仅见于动物实验的文献报道,个别医院也在应用该方法,但尚未正式报道。该方法是使用静脉穿刺的方法,将神经干细胞滴入血液循环,干细胞通过血液循环到达神经系统,透过血脑屏障到达脑组织发挥作用。其优点是创伤小、容易被患者所接受,经静脉移植避免损伤正常脑组织,且可以通过反复多次移植来弥补到达病灶区神经干细胞移少之不足。如Jeong等经大鼠尾静脉植入神经干细胞移,证实进入脑内的神经干细胞移有10%成功分化为神经元,并与周围正常神经元建立了突触联系。但经静脉进行神经干细胞移移植的不利因素在于,从外周静脉进入脑内需经长时迁移,最后进入脑内的细胞数量十分有限,从而导致移植成功率不高。从理论上来讲,大量的移植细胞没有进入所希望治疗的病灶区域,而是在血液循环中消耗掉了,加大移植细胞的数量的话,理论上可能有足够数量的干细胞进入病灶区域发挥作用,但同时会使治疗成本升高。
2、动脉内注射移植
动脉内注射移植的原理基本与静脉内注射移植相同,主要是部分学者考虑通过直接将干细胞在供脑动脉内注射,可以减少干细胞在血液循环中的损失,提高干细胞的利用率。多采用颈内动脉穿刺的方法移植干细胞,这样可以使移植的干细胞集中流到脑组织内部,减少细胞耗损。该方法缺点是有可能使老年患者动脉壁上的血栓脱落形成新的脑血栓,以及可能形成夹层动脉瘤。
以上几种干细胞移植途径各有优缺点,均为干细胞的动物实验及临床研究提供了移植方法。笔者认为很难评价各种方法的优劣,而应该在各种方法的完善上进一步进行研究,掌握每种方法的适应证,必要时可以两种或两种以上方法联合应用,以达到最好的治疗效果。
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