国内tils免疫细胞疗法（til免疫疗法 中国）

本文目录一览：

• 1、第27周-过继性T细胞治疗(adoptive T-cell therapy,ACT)
• 2、生物细胞治疗是红景天可用于开发护肤抗衰老化妆品真的吗
• 3、TILs疗法是什么？治疗效果如何，能参加临床试验吗？
• 4、治疗癌症的免疫疗法到底是什么?
• 5、生物免疫疗法是什么?生物免疫疗法有用吗?

第27周-过继性T细胞治疗(adoptive T-cell therapy,ACT)

文章是 Immune recognition of somatic mutations leading to complete durable regression in metastatic breast cancer 发表于 Nature Medicine (2018) 重点在实验设计环节，但是现在的大文章或多或少都引入多组学数据，本文也不例外，实验纳入的唯一一个病人既做了全外显子又做了转录组测序，还有单细胞测序。不过数据公开的是 PRJNA342632 for exome data and PRJNA243084 for RNA-seq data

近年来，肿瘤免疫疗法已成为继手术、放疗和化疗之后的第四种肿瘤治疗手段。

肿瘤免疫治疗 ，主要包括

其中以CTLA4、PD1/PDL1抑制剂为代表的 免疫检查点抑制剂 ，以其显著的临床疗效而备受瞩目。

而本文的研究属于肿瘤免疫治疗的过继性T细胞疗法（ACT）领域，之前以CART为主，最近出现了另外一种疗法——TIL（Tumor Infiltrating T cell，肿瘤浸润淋巴细胞），表现也十分惊艳，Rosenburg博士及其团队就是这一领域的代表。

肿瘤浸润性淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocyte, TIL）指的是从肿瘤组织中分离出的浸润淋巴细胞。

1986年，Rosenberg研究组首先报道了TIL细胞。TIL细胞表型具有异质性。一般来说，在TIL中，绝大多数细胞是CD3阳性的。在不同肿瘤来源的TIL细胞中，CD4+ T细胞、CD8+ T细胞的比例有差异，但大多数情况下以CD8+T细胞为主。

不同患者不同肿瘤类型对免疫疗法的反应不可预测，是因为免疫成分的异质性以及肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）在单个肿瘤内和患者之间的多样化表型。

并不是所有的肿瘤浸润T细胞都是针对肿瘤抗原的，并且发现检测CD39的表达可以简单的量化或分离Bystander 即“旁观者”T细胞。

早在2014年的时候Rosenburg博士的团队就将其一部分研究结果发表在Science期刊（Tran E et al, Science 2014）上，当时他们的做法是：把一名晚期胆管癌女患者的肺转移肿瘤 病灶 拿来做全基外显子测序，找到了26个非同义突变， 并为每一个突变构建了一段短基因，将这些短基因几个一组地串联成短基因串（Tandem Minigene, TMG） ，然后将这些短基因串转入抗原递呈细胞（指树突状细胞DC）并与肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）共同培养，以查看患者的TIL中是否存在可以特异性识别肿瘤突变的T细胞。不出所料，这位患者的TIL可以识别肿瘤的一个突变。研究者将这个有识别功能的T细胞体外大量扩增后再回输给患者，患者肝部的转移灶长期稳定状态达1年以上。Rosenburg博士的团队通过这个研究，证明了晚期癌症患者的肿瘤组织中确实是存在可以对抗肿瘤突变的淋巴细胞的、即便是在晚期胆管癌这样凶险又难治的瘤种。

参考自：肿瘤资讯。

但是从实体瘤中收集浸润性T细胞确实比较有挑战性，而与之相比，抽取患者的外周血则容易得多 ，所以2016年Steve Rosenberg小组发表在《自然-医药》杂志上的文章《Prospective identification of neoantigen-specific lymphocytes in the peripheral blood of melanoma patients》即是从晚期恶性黑色素瘤患者的 外周免疫细胞 中可根据PD-1受体表达找到针对肿瘤变异新抗原的活性杀伤T细胞。这样找到的T细胞在体外增殖后和肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）一样可以识别患者自身肿瘤。

但是恶性黑色素瘤是一种突变比较多的肿瘤，尽管外周血抗肿瘤细胞比例低，但是仍然能够分离出来；而其他突变较少的肿瘤在外周血中是否同样存在这样的T细胞就存疑了。

虽然作者本文只探索了一个病人，但是它上传了很多数据在，对这个病人测了：

也是常规的肿瘤外显子数据分析流程，其实就是GATK best-practices 流程加上 varscan2，再使用 ‘allele-specific copy-number analysis of tumors’ (ASCAT) 和Sequenza 来分析肿瘤纯度和倍性，然后得到的somatic 变异过滤如下：

其RNA-seq测序也是走的STAR比对加上GATK best-practices 流程来找变异。

最后使用 PyClone 进行克隆进化分析。

这里过滤后剩下 62 nonsynonymous somatic 变异位点

通过与前面文章类似的方法，构建TMG来挑选病人那些可以特异性识别这些突变的TIL细胞。本次使用使用了pulsed peptide pools (PPs 1–6) or transfected mRNAs (tandem minigenes (TMGs) 1–6)

得到的结果如图：

挑选那些高表达T cell receptor (TCR)-β variable (TRBV) region or high expression levels of 4-1BB (CD137, a marker of T cell activation)的T细胞做单细胞测序，找到了跟mutant (mut)-SLC3A2 or mutKIAA0368对接的 TRBV

然后TIL回输之后， FACS-sorted TRBV28+ cells showed specific recognition of PP6 and TMG6，如下图

又对应到了两个突变：

整个实验比较幸运，对这个病人来说，发现了 11 TCR clonotypes recognized the four neoantigens (SLC3A2, KIAA0368, CADPS2 and CTSB)

其实我植物干细胞美容的副作用看的不是很懂，可能就是明白其中的组学数据分析环节吧，而且作者单细胞测序也说的不清不楚的。

但是这个作者持之以恒的发大paper，应该是很牛吧。

（文章转自jimmy的2018年阅读文献笔记）

生物细胞治疗是真的吗

是真的，但价格不菲，而且目前还没有普及，也很难找到有能力做细胞治疗的医院

目前临床上常用几种细胞免疫治疗包括：

（1）自体树突状细胞疫苗（DC细胞）；

（2）自体细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK细胞）；

（3）自体树突状细胞（DC）刺激CIK细胞（DC-CIK细胞）

（4）自体自然杀伤细胞（NK细胞）；这些细胞在人体内的含量都很低，不足1%，因此我皮肤和毛发护理器具们就为患者提供了一种方法，那就是体外扩增培养，为患者提供个性化治疗。

TILs疗法是什么？治疗效果如何，能参加临床试验吗？

TILs疗法既是肿瘤浸润淋巴细胞疗法，具有杀伤能力更强、细胞培养过程不同、扩增数量庞大等特点，是近年来新兴的癌症治疗方式，临床数据显示对多种癌症的控制率有显著的效果，比如黑色素瘤、宫颈癌、卵巢癌、肺癌等。国内专业癌症网站全球肿瘤医生网对TILs疗法有过多篇报道。

治疗癌症的免疫疗法到底是什么?

免疫治疗是指用自身的免疫系统去治疗疾病的一类方法。通过调动患者自身抵抗力（免疫细胞）来抵御、杀死肿瘤细胞，是近年来肿瘤治疗的一个发展方向，也是当前癌症研究领域中的热点之一。

目前免疫治疗大致有两种：第一种是免疫检测点阻断剂药物。这些药物能使癌细胞周围削弱免疫系统的信号失效，使免疫细胞不被蒙蔽，继续攻击肿瘤细胞。如抗体阻断CTLA-4以及PD-1通路，能阻断肿瘤细胞对T细胞的“欺骗”，让T细胞恢复对肿瘤细胞识别和杀伤的能力。魏则西托香港朋友带回来的产生疗效的“靶向药”Keytruda正属于PD-1抗体药物，是被美国FDA批准的首个PD-1抗体药物。

另一种是免疫细胞疗法。简单说就是抽取患者体内的免疫细胞，把肿瘤的特征“告诉”免疫细胞，在体外诱导出可能具有杀伤肿瘤能力的细胞，再输回患者体内进行“战斗”。此类疗法包括LAK，DC，CIK，DC-CIK，CAR-T，TCR-T，NK，CAR-NK，肿瘤浸润性淋巴细胞（TILs）等等。但是经过十数年的研究，大浪淘沙始到金，眼下有出色作用的是CAR-T，TCR-T这两种细胞治疗方法。

日本作为国际上率先批准使用细胞免疫疗法的国家之一，在近二十年的不懈努力研究下，将细胞免疫疗法打造成了具有打破机体免疫耐受、激活和增强受体的免疫能力、兼顾重症治疗、癌症防复发及重症治疗后快速恢复的三重功效的治疗新技术。以多睦健康服务过的癌症病人前往日本做细胞免疫治疗的案例来看，的确可以达到比较好的疗效。目前日本细胞免疫疗法已经成为癌症治疗新趋势。

生物免疫疗法是什么?生物免疫疗法有用吗?

魏则西患有罕见的滑膜肉瘤晚期，通过北京武警二院的生物免疫疗法治疗，但结果还是去世了。那么生物免疫疗法是什么?生物免疫疗法有用吗?

生物免疫疗法是什么

免疫治疗是指用自身的免疫系统去治疗疾病的一类方法。通过调动患者自身抵抗力（免疫细胞）来抵御、杀死肿瘤细胞，是近年来肿瘤治疗的一个发展方向，也是当前癌症研究领域中的热点之一。

目前免疫治疗大致有两种：第一种是免疫细胞疗法。简单说就是抽取患者体内的免疫细胞，把肿瘤的特征“告诉”免疫细胞，在体外诱导出可能具有杀伤肿瘤能力的细胞，再输回患者体内进行“战斗”。此类疗法包括LAK、DC、CIK、DC-CIK、CAR-T、TCR-T、NK、CAR-NK，肿瘤浸润性淋巴细胞（TILs）等等。但是经过十数年的研究，大浪淘沙始到金，眼下有出色作用的是CAR-T、TCR-T这两种细胞治疗方法。

另一种是免疫检测点阻断剂药物。这些药物能使癌细胞周围削弱免疫系统的信号失效，使免疫细胞不被蒙蔽，继续攻击肿瘤细胞。如抗体阻断CTLA-4以及PD-1通路，能阻断肿瘤细胞对T细胞的“欺骗”，让T细胞恢复对肿瘤细胞识别和杀伤的能力。魏则西托香港朋友带回来的产生疗效的“靶向药”Keytruda正属于PD-1抗体药物，是被美国FDA批准的首个PD-1抗体药物。

此次事件中涉及的CIK/DC-CIK疗法，属于上面提到的免疫治疗的第一种，即通过体外训练免疫细胞“战士”的做法。

DC-CIK细胞疗法，主要原理如下，首先将患者自己的DC细胞提取出来在体外同患者手术切除的肿瘤组织或者是肿瘤相关抗原肽进行抚育来诱导DC细胞成熟，同时将患者的淋巴细胞提取出来在体外用细胞因子激活成为CIK细胞，然后在体外将肿瘤抗原诱导成熟的DC细胞和CIK细胞共同培养进行肿瘤抗原呈递来激活肿瘤抗原相应的淋巴细胞，再把它们回输给病人体内。

生物免疫疗法有用吗

目前国内所有的免疫治疗都是辅助治疗，肿瘤治疗主要还是以手术、放疗、化疗以及靶向治疗为主，所进行的细胞免疫治疗目的是提高患者整体的免疫能力，还不能作为一个独立的治疗手段对肿瘤患者进行治疗。而且免疫疗法对于各种癌症疗效不一，效果也因个人而异。

DC-CIK治疗目前也只能对很少数一些病人有一些特异的作用，但是总体效应不大，不能做为主要治疗手段。因此国内大多数肿瘤医院和研究治疗中心都是把DC－CIK治疗作为手术、放疗、化疗之外的一种辅助治疗手段。要真正直接用于临床，还需在DC-CIK技术有明确突破之后。

肿瘤免疫治疗虽然没能拯救魏则西，但在肿瘤免疫治疗的道路上，并不总是失望，也有一些令人兴奋的成果。

琳达·泰勒（LindaTaylor），免疫疗法的第一个受益者，1984年美国国家癌症研究所史蒂文·A·罗森伯格（StevenA.Rosenberg）团队用高剂量白细胞介素-2（IL-2）成功地治愈了琳达·泰勒晚期转移性黑色素瘤患者。

2008年第358期《新英格兰医学杂志》，刊登美国MD安德森癌症中心对一名52岁男性恶性黑色素瘤患者在进行免疫治疗的报道。免疫治疗前，其肿瘤复发并伴随转移，并对高剂量α-干扰素、4周期的高剂量白介素-2及局部切除的治疗方式无效。后给予患者体外扩增并回输特异性CD4+T细胞，两个月后患者所有的病灶消失，两年内没有肿瘤的复发。这是医学界首例利用复制免疫细胞的方法成功治愈癌症的个案。不过，后来在各种肿瘤上没有得到很好的再现。

2015年，《新英格兰医学杂志》又报道了一位患有溃烂性黑色素瘤的49岁女性病人，在免疫疗法联合用药I期临床实验中，接受CTLA-4抑制剂Ipilimumab与PD-1抑制剂Nivolumab联合注射3周后，转移瘤迅速消失。

另外CAR-T疗法在血液肿瘤上也取得了一些很好的成果。最为人熟知的例子是一名叫理查德兹的小女孩，她在出生后不久经诊断患有急性淋巴性白血病，在不满一岁的时候，接受了CAR-T疗法的治疗，成功帮她清除了体内的癌细胞。

MIT科技评论（MITTechnologyReview）也曾报道过一例CAR-T疗法成功治愈的例子：一名20岁的青年MiltonWright，在白血病第三次发作后，选择了参加CAR-T疗法的临床试验。尽管在将改造后的T细胞注射回体内后，Milton一度出现了高烧等严重反应，但他最终还是战胜了病魔。在离开重症监护病房后，医生对他的骨髓癌细胞数进行了评估，而评估的结果是“0”。

癌症的早期症状

癌症的早期症状之胃癌：突然出现原因不明的消化不良症状，而且比较顽固、进展快；突出的表现为食欲迅速下降、食后腹部饱囘胀感及不适感，同时，体重明显降低。或者，过去没出有胃痛（“心窝痛”）的人，突然出现反复的胃痛；以前虽有胃痛，但近来疼痛的强度、性质、发作的时间突然改变，且原来治疗有效的药物变得无效或欠佳。

癌症的早期症状之食道癌：吞咽食物有迟缓、滞留或轻微梗噎感，可自行消退，但数日后又可出现，反复发作，并逐渐加重。或在吞口水或吃东西时，总感觉胸骨有定位疼痛。平时感觉食管内有异物且与进食无关，持续存在，喝水及咽食物均不能使之消失。

癌症的早期症状之肝癌：早期肝癌无特异性症状，如有亦多是癌前疾病的一些复杂表现。但是如果慢性肝炎或肝硬化的病人，右上腹或肝区出现刺痛或疼痛加剧，身体不适，食欲减退，进行性消化不良，伴有顽固性腹泻及体重明显下降时，应高度警惕。

癌症的早期症状之直肠癌：凡30岁以上的人出现腹部不适、隐痛、腹胀、大便习惯发生改变，出现便秘、腹泻或者交替出现，有下坠感，且大使带血，继而出现贫血，疲乏无力，腹部摸囘到肿块，应考虑大肠癌的可能。其中沿结肠部位呈局限性、间歇性隐痛是结肠癌的第一个报警信号。下坠感明显伴大便带血，则是直囘肠癌的信号（大肠癌包括结肠癌和直囘肠癌）。

癌症的早期症状之肺癌：咳嗽是肺癌的早期症状，其特点是以阵发性刺囘激性呛咳为主，有咳不净的感觉，一般无痰或只有少量白色泡沫痰，继发感染可出现脓痰。如经抗炎治疗2周后无改善，应警惕肺癌的可能。或在原有慢性咳嗽基础上出现咳嗽性质改变，甚至伴有“气管鸣”、“气短”应予注意。肺癌的另一警号是间断性反复少量血痰，或痰中带血丝。此外，还出现胸背痛、胸闷、发热等症状。