干细胞专用储存管使用指南：确保细胞活力和增殖力
干细胞专用储存管使用指南：确保细胞活力和增殖力
1. 材料准备
无菌干细胞专用储存管
含 DMSO 的细胞培养基或冷冻保护液
冰浴或冰块
防护手套
移液管
2. 细胞悬液制备
将细胞从培养皿中收集到离心管中。
根据细胞类型和数量，添加适当体积含 DMSO 的细胞培养基或冷冻保护液。
轻柔混匀，避免产生气泡。
3. 分装细胞悬液
使用移液管将细胞悬液分装到无菌干细胞专用储存管中。
每支储存管的容量不应超过其标称容量的 80%。
操作过程中应始终保持无菌环境。
4. 冷却
将储存管置于冰浴或冰块中。
缓慢冷却细胞，每分钟下降约 1°C。
避免突然降温，以免造成细胞损伤。
5. 转移至液氮罐
冷却至 -80°C 后，将储存管转移至液氮罐中。
使用专用的储存容器或架子进行存放。
确保储存管完全浸没在液氮中。
6. 解冻
从液氮罐中取出储存管时，应佩戴防护手套。
迅速将储存管置于 37°C 水浴中，不断摇晃。
不要完全打开储存管，仅松开管盖一侧进行解冻。
解冻后，立即将细胞转移至预热的培养基中。
7. 复苏
根据特定的细胞类型，将细胞转移至合适的培养基中。
培养细胞 24-48 小时后，观察细胞活力和增殖能力。
如果细胞活力较低，可考虑更换培养基或补充生长因子。
8. 注意要点
使用高品质的干细胞专用储存管，以确保细胞的安全性。
严格遵守无菌操作，防止细胞污染。
缓慢冷却和解冻细胞，以避免细胞损伤。
定期检查液氮罐的液氮水平，确保细胞始终处于低温储存状态。
定期进行细胞活力检测，监测细胞的健康状态。
储存细胞时应建立详细的储存记录，包括储存日期、细胞类型、储存条件等信息。
标签： 生物细胞储存的技术和方法
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