玻璃管储存血细胞方法
玻璃管储存血细胞方法
1. 耗材和设备概述
玻璃管
防凝剂（例如 EDTA、枸橼酸钠）
移液枪
次氯酸钠溶液 (1%)
自来水
灭菌器
冰箱
2. 玻璃管准备
1. 将玻璃管浸泡在次氯酸钠溶液中至少 24 小时。
2. 用自来水彻底冲洗玻璃管。
3. 在 121°C 下高压灭菌 15 分钟。
3. 血液采集
1. 使用 10-15 毫升 EDTA 或枸橼酸钠防凝管采集全血。
2. 轻柔摇晃管子以防止凝血。
4. 血液分层
1. 将全血样品在 4°C 下离心 10 分钟，2000×g。
2. 小心移除上清血浆，保留血细胞。
5. 血细胞洗涤
1. 用 4°C PBS 缓冲液重新悬浮血细胞。
2. 在 4°C 下离心 5 分钟，2000×g。
3. 小心移除上清液。
4. 重复步骤 1-3 两次，共洗涤三次。
6. 血细胞计数和调整
1. 使用血细胞计数板计数血细胞。
2. 根据需要用 PBS 缓冲液调整细胞浓度。
7. 玻璃管填充
1. 使用移液枪将细胞悬浮液转移到已准备好的玻璃管中。
2. 填充量通常为 0.5-2 毫升，具体取决于玻璃管的尺寸。
8. 密封和储存
1. 使用橡胶塞或聚异丁烯封口塞密封玻璃管。
2. 将玻璃管直立放置在 4°C 冰箱中储存。
9. 监测和维护
1. 定期监测玻璃管是否有渗漏或液位变化。
2. 如果玻璃管破损或渗漏，请立即更换。
3. 每 6-12 个月更换一次 PBS 缓冲液。
10. 注意事项
始终使用无菌技术并佩戴适当的个人防护装备。
遵循所有生物安全规程。
使用经过验证的试剂和设备。
仅在受过培训和有经验的人员监督下进行该程序。
血细胞储存时间长短因细胞类型和储存条件而异。
标签： 生物细胞储存的未来发展
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