在小液氮罐中储存细胞的指南
在小液氮罐中储存细胞的指南
随着再生医学和干细胞技术的不断发展,储存活细胞变得至关重要。小液氮罐提供了一个安全的、长期的储存环境,可以将细胞维持在超低温下。本指南将详细介绍在小液氮罐中储存细胞的正确步骤。
1. 准备细胞
收集并分离所需的细胞。
在适当的培养基中培养细胞并使其达到所需的生长阶段。
确认细胞活性并无污染。
2. 准备储存液
选择合适的储存液,例如含DMSO(二甲基亚砜)的培养基或血清。
储存液应提供对细胞的保护,并防止其在超低温下冻结。
3. 冻存细胞
在储存液中悬浮细胞。
将细胞移至冻存小瓶或冷冻管中。
缓慢降温细胞,通常使用一种受控速率的冷冻机。
将冻存的小瓶转移至小液氮罐中。
4. 小液氮罐的维护
小液氮罐应填充至适当的液氮水平。
定期检查液氮水平,并根据需要补充。
维护发泡剂罐,以提供绝缘并防止液氮蒸发。
5. 细胞的解冻
从小液氮罐中取出冻存小瓶。
在37°C的水浴中快速解冻细胞。
加入培养基稀释储存液。
用离心机离心细胞并去除储存液。
将细胞 resuspend 在新鲜培养基中并进行培养。
6. 细胞复苏
解冻后的细胞需要一个恢复期。
提供适当的培养环境,包括培养基、生长因子和温度。
监测细胞活力和生长。
在复苏后,细胞可以进一步使用或冷冻保存以供将来使用。
7. 安全注意事项
处理液氮时应始终佩戴合适的个人防护装备。
避免直接接触液氮。
定期检查和维护小液氮罐以确保安全运行。
遵守实验室安全规程和准则。
结论
通过遵循这些步骤,可以在小液氮罐中安全、长期地储存细胞。适当的储存和维护对于确保细胞的活力和功能至关重要。通过遵循本指南,研究人员和科学家可以利用小液氮罐的力量来推进他们的研究和开发应用。
标签: 生物细胞储存的概述
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