红细胞冷冻储存的最佳实践
红细胞冷冻储存的最佳实践
1. 血液收集和处理
采集新鲜的全血样品，避免使用抗凝剂。
将血液转移到无菌密闭容器中。
以每分钟 500 rpm 的速度离心 15 分钟，分离红细胞。
去除上清液，保留红细胞沉淀。
2. 冷冻保护剂的添加
使用冷冻保护剂（通常为二甲基亚砜）代替血清或其他成分。
冷冻保护剂可降低冰晶形成，保护红细胞免受冷冻损伤。
根据制造商的说明添加冷冻保护剂，通常为 10-20%（体积/体积）。
3. 冷却和冷冻
将含冷冻保护剂的红细胞悬浮液缓慢冷却至 -80°C，以每分钟 1°C 的速度下降。
缓慢冷却过程使红细胞适应寒冷的环境。
达到 -80°C 后，将红细胞转移到液氮低温储存容器中。
4. 液氮储存
液氮是冷冻储存红细胞的理想介质，可保持 -196°C 的极低温度。
将红细胞储存容器浸没在液氮中至其颈部。
定期检查和补充液氮，以确保储存温度保持恒定。
5. 解冻和复苏
解冻时，将冷冻容器从液氮中取出并放置在 37°C 的水浴中 1-2 分钟。
缓慢解冻过程可防止复苏时发生渗透性损伤。
解冻后，立刻洗去冷冻保护剂。
使用浓度梯度离心方法，小心去除洗涤液。
6. 质量控制和监测
定期监测冷冻储存的红细胞的质量。
检查细胞活力、形态和溶血率。
保持详细的储存和处理记录，以跟踪和确保红细胞的完整性。
7. 安全注意事项
液氮低温储存和处理需要采取适当的安全措施。
穿着低温手套、护目镜和防护服。
远离液氮逸出的区域。
在通风良好的区域处理液氮。
结论
遵循这些最佳实践对于确保红细胞冷冻储存的成功至关重要。通过仔细控制冷却、冷冻保护剂添加、储存温度和解冻复苏，可以最大限度地保持红细胞的活力和完整性，从而便于使用时的功能。
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