细胞裂解液的储存指南:优化细胞提取和分析
细胞裂解液的储存指南:优化细胞提取和分析
1. 储存温度
理想的储存温度为 -80℃ 或以下。
在这种温度下,细胞裂解液中的酶活性最小,从而减少了蛋白质降解的风险。
2. 冷冻储存
将细胞裂解液装入冷冻管中,每管体积不超过管体积的 2/3。
快速冷冻细胞裂解液以最小化冰晶形成。
使用液氮罐或超低温冰箱进行冷冻。
3. 避免反复冻融
反复冻融会破坏细胞裂解液中的蛋白质和酶。
尽量一次性使用所需的细胞裂解液量,并丢弃任何剩余的细胞裂解液。
4. 保护免受光线照射
光线照射会激活酶并导致蛋白质降解。
将细胞裂解液储存在不透明的容器中或将其包裹在箔纸中。
5. 加入蛋白酶抑制剂
蛋白酶抑制剂可防止蛋白质降解。
根据要分析的蛋白质类型选择合适的蛋白酶抑制剂混合物。
6. 加入还原剂
还原剂,例如 DTT 或 β-巯基乙醇,可防止蛋白质氧化。
应根据制造商的说明添加还原剂。
7. 缓冲液选择
细胞裂解液的缓冲液选择应根据要提取的蛋白质类型进行优化。
中性和低盐缓冲液通常适用于大多数蛋白质。
8. 其他注意事项
避免过度搅拌细胞裂解液,因为它会破坏蛋白质。
细胞裂解液的储存时间应根据制造商的说明和特定应用而定。
如果储存不当,细胞裂解液可能会出现蛋白质降解、酶失活和其他问题。
结论
通过遵循这些储存条件,可以确保细胞裂解液中的蛋白质和酶活性得到保留,从而获得可靠和准确的细胞提取和分析结果。
标签: 生物细胞储存的意义和应用
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