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细胞裂解液的储存指南:优化细胞提取和分析

生物细胞储存的意义和应用 2024年04月18日 15:36 60 im

  细胞裂解液的储存指南:优化细胞提取和分析

  1. 储存温度

   理想的储存温度为 -80℃ 或以下。

   在这种温度下,细胞裂解液中的酶活性最小,从而减少了蛋白质降解的风险。

  2. 冷冻储存

   将细胞裂解液装入冷冻管中,每管体积不超过管体积的 2/3。

   快速冷冻细胞裂解液以最小化冰晶形成。

   使用液氮罐或超低温冰箱进行冷冻。

  3. 避免反复冻融

   反复冻融会破坏细胞裂解液中的蛋白质和酶。

   尽量一次性使用所需的细胞裂解液量,并丢弃任何剩余的细胞裂解液。

  4. 保护免受光线照射

   光线照射会激活酶并导致蛋白质降解。

   将细胞裂解液储存在不透明的容器中或将其包裹在箔纸中。

  5. 加入蛋白酶抑制剂

   蛋白酶抑制剂可防止蛋白质降解。

   根据要分析的蛋白质类型选择合适的蛋白酶抑制剂混合物。

  6. 加入还原剂

   还原剂,例如 DTT 或 β-巯基乙醇,可防止蛋白质氧化。

   应根据制造商的说明添加还原剂。

  7. 缓冲液选择

   细胞裂解液的缓冲液选择应根据要提取的蛋白质类型进行优化。

   中性和低盐缓冲液通常适用于大多数蛋白质。

  8. 其他注意事项

   避免过度搅拌细胞裂解液,因为它会破坏蛋白质。

   细胞裂解液的储存时间应根据制造商的说明和特定应用而定。

   如果储存不当,细胞裂解液可能会出现蛋白质降解、酶失活和其他问题。

  结论

  通过遵循这些储存条件,可以确保细胞裂解液中的蛋白质和酶活性得到保留,从而获得可靠和准确的细胞提取和分析结果。

标签: 生物细胞储存的意义和应用

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