血制品淋巴细胞储存的最佳条件
血制品淋巴细胞储存的最佳条件
1. 储存温度
淋巴细胞对温度变化非常敏感。最佳储存温度为 4°C。较高的温度会加速细胞死亡,而较低的温度会抑制细胞功能。细胞在 4°C 下可以保存长达 24 小时。
2. 储存介质
淋巴细胞应储存 ??富含营养的介质中,以维持其活力。标准储存介质是 RPMI 1640 培养基,补充 10% 血清(通常是牛血清)。血清提供生长因子和其他营养物质,支持细胞生存。
3. 储存容器
淋巴细胞应储存 ??无菌且不透光的容器中。无菌性以防止污染,而遮光性以保护细胞免受有害紫外线辐射影响。通常用于储存淋巴细胞的容器包括聚苯乙烯管、冷冻管和细胞培养板。
4. 细胞浓度
最佳储存细胞浓度在每毫升 100 万至 500 万个细胞之间。过高的细胞浓度会促进细胞死亡,而过低的细胞浓度会使细胞难以收集和处理。
5. 储存时间
淋巴细胞在 4°C 条件下可保存长达 24 小时,而无需额外的处理。对于更长时间的储存,需要低温保存。
6. 低温保存
对于长期储存,淋巴细胞应使用冷冻保护剂(如二甲基亚砜 DMSO)进行低温保存。将细胞悬浮在含 DMSO 的介质中,然后在 -80°C 或液氮中储存。在这些条件下,细胞可长期保存。
7. 复苏
当需要使用时,淋巴细胞可以通过逐渐解冻和洗涤来复苏。解冻后,细胞应立即使用或按照适当的细胞培养规程储存。
8. 细胞评估
复苏后,应评估淋巴细胞的活力和功能。这可通过流式细胞术、细胞计数和功能测定进行。
9. 储存期间的注意事项
储存期间,应定期监测淋巴细胞的活力和功能。如果细胞活力下降或出现污染迹象,应丢弃细胞并从新鲜样品中重建储存。
遵守这些储存条件对于维持淋巴细胞的活力???功能至关重要。正确储存可以确保细胞在需要时可用于研究、诊断或治疗目的。
标签: 生物细胞储存的概述
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