细胞裂解液储存的最佳实践

生物细胞储存的意义和应用 2024年04月26日 15:43 109 im

　　细胞裂解液储存的最佳实践

　　细胞裂解液是破碎细胞以释放其内部成分的液体。它们广泛用于生物化学和分子生物学研究中，用于提取蛋白质、核酸和其他生物分子。为了确保细胞裂解液的完整性，在储存期间必须遵循适当的程序。

　　1. 储存温度

　　最佳储存温度：-80°C 或更低

　　较低温度可抑制酶活性并防止蛋白质降解。

　　2. 储存容器

　　使用不透光的、无菌的一次性管。

　　不透光的容器可防止光降解。

　　3. 储存时间

　　短期储存（< 1 个月）：-80°C

　　长期储存（1 个月以上）：-150°C 或液氮中

　　4. 储存条件

　　分装成小体积（50-100 μL）。

　　避免频繁冻融循环。

　　标明样品信息（日期、时间、细胞类型）。

　　5. 蛋白酶抑制剂

　　在裂解液中加入蛋白酶抑制剂混合物，以防止蛋白质降解。

　　推荐的抑制剂包括 PMSF、苯甲基磺酰氟化物和 EDTA。

　　6. 核酸保护

　　如果需要提取核酸，在裂解液中加入 RNase 抑制剂以防止 RNA 降解。

　　推荐的抑制剂包括 RNaseOut 和 SUPERase-In。

　　7. 特殊注意事项

　　脂质提取：对于脂质提取，使用甲醇：氯仿混合裂解液，并将其冷藏于 4°C。

　　细胞外基质提取：对于细胞外基质提取，使用蛋白酶裂解液，并将其冷藏于 4°C。

　　遵循最佳实践的好处

　　遵循这些最佳实践的好处包括：

　　保持蛋白质和核酸的完整性。

　　防止酶降解和光降解。

　　延长细胞裂解液的储存时间。

　　确保准确可靠的研究结果。

　　通过采用这些储存程序，研究人员可以确保他们手中的细胞裂解液处于最佳状态，从而进行成功的生物化学和分子生物学研究。

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