细胞存储的创新：小鼠脾脏细胞存储方法
细胞存储的创新：小鼠脾脏细胞存储方法
引言：
小鼠模型在生物医学研究中至关重要，而脾脏是免疫细胞的关键来源。脾脏细胞的储存可以为未来的实验提供宝贵的资源。本视频教程将指导您了解小鼠脾脏细胞的最佳储存方法。
材料：
1. 小鼠
2. 无菌手术器械
3. 细胞培养基
4. 冷冻液
5. 冰
6. 冷冻管
方法：
1. 小鼠麻醉：
使用适当的方法对小鼠进行麻醉。
2. 切除脾脏：
用消毒的手术器械切开小鼠的腹腔，取出脾脏。
3. 制备细胞悬液：
将脾脏捣碎于冷冻细胞培养基中。用移液枪将悬液转移到离心管中。
4. 离心和细胞计数：
以 300 x g 离心细胞悬液 5 分钟。收集沉淀细胞，计数活细胞。
5. 冻存细胞：
将细胞悬液与冷冻液（通常为 10% DMSO）按 1:1 的比例混合。
6. 冷冻：
将装有细胞悬液的冷冻管缓慢（每分钟 1-2°C）放入预冷至 -80°C 的冰箱中。
7. 液氮储存：
将冷冻管转移至液氮罐中进行长期储存。
注意事项：
1. 使用无菌技术以防止细胞污染。
2. 选择合适的细胞培养基以维持细胞活力。
3. 缓慢冻存以防止细胞损伤。
4. 标记冷冻管并记录细胞信息。
解冻和复苏细胞：
1. 从液氮中取出冷冻管，在 37°C 水浴中快速解冻。
2. 将细胞悬液稀释至合适浓度。
3. 以 1000 x g 离心细胞悬液 5 分钟。
4. 收集细胞沉淀，用新鲜细胞培养基重悬。
结论：
通过遵循这些步骤，您可以成功储存小鼠脾脏细胞，以便将来进行实验。这种方法可确保细胞活力和功能的保存，为您的研究提供宝贵的资源。
标签： 生物细胞储存的概述
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