白细胞浓缩悬液储存的最佳实践
白细胞浓缩悬液储存的最佳实践
1. 储存温度
白细胞浓缩悬液对温度变化非常敏感，冷冻保存至关重要。理想的储存温度为：
-196°C 或以下的超低温冰箱或液氮罐
-80°C 至 -150°C 的机械深冷冰箱
用液氮制成的干冰或液氮浴 (-196°C)
2. 储存容器
白细胞浓缩悬液应保存在经过验证的、无菌的、密封的储存容器中。通常使用的容器包括：
低温冻存管
冷冻瓶
灭菌试管
3. 降温曲线
降温率对白细胞的存活率至关重要。逐渐降温可防止细胞破裂和冰晶形成。建议的降温速率为：
-1°C 至 -10°C/分钟（超低温冰箱）
-10°C 至 -20°C/分钟（干冰浴）
-20°C 至 -80°C/分钟（液氮浴）
4. 保存时间
白细胞浓缩悬液的储存时间因储存温度和使用情况而异。一般储存寿命为：
>-196°C：10-15 年
-80°C 至 -150°C：5-10 年
-20°C 至 -80°C：1-2 年
5. 融化程序
融化白细胞浓缩悬液时，遵循正确的程序对于保持细胞活力至关重要。推荐的融化方法包括：
放入 37°C 的水浴中
在 37°C 的细胞融化器中
使用经过验证的细胞融化试剂
6. 融化后处理
融化后，白细胞浓缩悬液应立即稀释并洗涤，以去除冷冻保护剂。通常的方法包括：
稀释在适当的细胞培养基中
离心去除冷冻保护剂
用培养基重悬细胞
7. 储存介质
储存白细胞浓缩悬液时，应使用合适的储存介质。通常使用的介质包括：
冷冻保护剂（如 DMSO 或血清）
培养基 (PBS 或 HBSS)
血清（如 FBS 或 HS）
8. 储存的手段
可以采用以下手段储存白细胞浓缩悬液：
液体氮罐：液氮罐提供长期储存（>10 年），但需要液氮填充。
超低温冰箱：超低温冰箱提供长期储存（5-10 年），但需要持续电力供应。
机械深冷冰箱：机械深冷冰箱提供中短期储存（1-2 年），但需要持续电力供应。
干冰浴：干冰浴提供短期储存（数小时至数天），但需要定期补充干冰。
9. 记录和监测
记录和监测白细胞浓缩悬液的储存条件对于确保其质量和完整性至关重要。应跟踪以下信息：
储存温度和持续时间
储存容器类型
冷冻保护剂和储存介质
融化日期和时间
细胞活力和完整性检测结果
10. 安全注意事项
处理白细胞浓缩悬液时，应采取适当的安全预防措施：
穿戴个人防护装备（如手套、口罩和护目镜）
在经过认证的生物安全柜中工作
遵循建立的实验室协议和标准操作程序 (SOP)
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