从干细胞储存柜中安全取出液体的综合指南
从干细胞储存柜中安全取出液体的综合指南
干细胞储存对于保护和未来使用珍贵的干细胞具有至关重要的作用。当需要从储存柜中取出液体时，至关重要的是要遵循安全有效的程序，以保持细胞的完整性和活力。本指南提供了分步说明，阐明了从干细胞储存柜中取出液体的最佳做法。
1. 准备
收集必要材料：无菌移液管、培养基、离心管、冰块
建立无菌环境：使用生物安全柜或在无菌罩下进行操作
佩戴个人防护装备：包括手套、实验室服和口罩
2. 标记管子
明确标记管子：用患者姓名、样本编号和日期标记离心管
记录：在实验室笔记本中记录样本的详细信息
3. 冷却储存柜
降低储存柜温度：将储存柜的温度降低到细胞储存的合适温度（通常为液氮温度）
等待冷却：等待储存柜冷却至目标温度
4. 转移储存容器
小心移除储存容器：从储存柜中小心取出细胞储存容器
使用镊子：使用无菌镊子将储存容器转移至冰块上
5. 融化液体
逐步融化：将储存容器放置在冰块上缓慢融化，避免温度骤变
避免过热：不要将储存容器直接暴露在热源下，以防止细胞损伤
6. 涡旋和转移
轻轻涡旋：一旦液体融化，轻轻涡旋储存容器以混合细胞
转移液体：使用无菌移液管将液体小心转移到标记好的离心管中
7. 稀释液体
稀释培养基：用适当的培养基稀释液体，以达到所需的细胞浓度
混合：轻轻涡旋以均匀混合细胞和培养基
8. 离心
离心样品：将离心管在适当的转速和时间下离心，以沉降细胞
弃置上清液：小心弃置上清液，仅保留细胞沉淀
9. 重悬细胞
重悬细胞：用新鲜的培养基重悬细胞沉淀，以达到所需的细胞浓度
使用细胞计数器：使用细胞计数器或血细胞计数仪确定细胞浓度并调整培养基体积
10. 保存细胞
储存细胞：将细胞悬液转移到新的培养瓶或冷冻管中
冷冻保存：如果需要长期储存，将细胞悬液冷冻保存于 -80°C 或液氮中
关键提示
始终遵循制造商的说明和标准操作程序（SOP）
使用无菌技术以避免细胞污染
缓慢融化液体以防止细胞损伤
正确稀释液体以达到所需的细胞浓度
仔细记录所有步骤和观察结果
定期维护和校准干细胞储存柜以确保最佳性能
标签： 细胞储存的种类
相关文章
发表评论