流式细胞术样本储存的最佳实践
流式细胞术样本储存的最佳实践
引言
流式细胞术已成为生物医学研究和临床诊断领域的不可或缺的工具。流式细胞术分析依赖于从生物样品中获取细胞悬液的有效储存和制备。样本储存条件对于保持细胞活力、完整性和表型特征至关重要，对获得准确和可靠的流式细胞术结果至关重要。
1. 样本采集和制备
样本采集方法取决于样品类型和分析目的。血液、骨髓和淋巴结等液体样品通常采集在抗凝剂管中。
组织样品需要机械或酶促解离以获得细胞悬液。
在采集后立即处理样品以避免细胞死亡和表型变化。
2. 样本储存温度
室温（20-25°C）：短时间储存（<2小时）的活细胞可以保存在室温下。
4°C：大多数细胞类型可以在4°C下储存长达24小时，而不会显着影响细胞活力。
-20°C：对于长达数月的储存，细胞可以通过冷冻保存保存。
-80°C或液氮：对于需要长期储存（>1年）的细胞，应将细胞保存在-80°C或液氮中。
3. 储存介质
缓冲液：磷酸盐缓冲液（PBS）或含乙二胺四乙酸（EDTA）或肝素等抗凝剂的溶液。
培养基：完全培养基或无血清培养基可用于活细胞的短期储存。
冷冻保护剂：二甲基亚砜（DMSO）或甘油等渗透剂可用于保护细胞免受冰晶形成的损害。
4. 样本体积
储存的样品体积应足够进行流式细胞术分析。
对于液体样品，通常建议储存1-5 mL。
对于组织样品，储存的细胞悬液体积根据细胞浓度和分析所需细胞数而变化。
5. 储存时间
储存时间取决于样本类型、储存温度和储存介质。
活细胞可以在4°C下储存长达24小时，在-20°C下储存长达数月。
通过冷冻保存的细胞可以在-80°C或液氮中储存数年。
6. 样本处理
在分析前，需要对储存的样品进行适当的处理。
活细胞可能需要洗涤以去除储存介质和抗凝剂。
冷冻保存的细胞需要复苏，通常通过在培养基中逐步解冻和离心去除冷冻保护剂来实现。
结论
流式细胞样本储存条件对获得准确和可靠的流式细胞术结果至关重要。遵循最佳实践，包括适当的样本采集和制备、温度控制、储存介质选择、样品体积、储存时间和样本处理，可以保持细胞活力、完整性和表型特征。通过优化样本储存条件，研究人员和临床医生可以提高流式细胞术分析的质量和准确性。
标签： 细胞储存的重要性
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